Petefészekrák xenografts egerek
Az OvCa metasztázisa magában foglalja a sejtek és a celluláris aggregátumok közvetlen kiterjesztését vagy hámlasztását a peritoneális üregbe, a mátrix-leválasztott sejtek túlélését komplex aszcites folyadékfázisban, majd a hasi szerveket tartalmazó mesothelium béléshez való tapadását, hogy szekunder elváltozásokat hozzanak létre, amelyek gazdasejt-és gyulladásos komponenseket tartalmaznak.
Kísérleti modellek kifejlesztése a metasztázis egyedülálló mechanizmusának feltérképezéséhez figyelemre méltó tudományos kihívást jelent, és számos más, szilárd tumorok például tüdő, vastagbél és mell tanulmányozására alkalmazott petefészekrák xenografts egerek nem alkalmazható az OvCa-kutatásra, mivel az adott metasztázismintát és az egyedülálló tumorot vizsgálják. Ez a felülvizsgálat az OvCa tanulmányozására irányuló kísérleti modellek fejlesztésében és finomításában a közelmúltban elért eredményeket tárgyalja.
Nemzetközi elismerés a pécsi Rákkutató- és Gyógyszerfejlesztő Központ kutatóinak | carbocomp.hu
Új sejtes, háromdimenziós organotípusos és ex vivo modelleket veszünk figyelembe, és az aktuális in vivo modelleket összegezzük. A felülvizsgálat kritikusan értékeli az OvCa jelenleg rendelkezésre álló genetikai egérmodelljeit, a xenopatikusok megjelenését és a tyúkmodell alkalmazhatóságát az OvCa prevenciójának, tumorigenesisének, metasztázisának és kemorezisztenciájának tanulmányozására.
Mivel ezek az új megközelítések pontosabban összefoglalják a TME komplexet, előre jelezzük, hogy új lehetőségek nyílnak meg a betegség előrehaladásának, metasztázisának és terápiás válaszának jobb megértéséhez. Bevezetés A petefészekrák OvCa továbbra is rosszul értelmezett betegség, rendkívül gyenge prognózissal.
Még mindig petefészekrák xenografts egerek eredetű sejtje, és a kutatók csak a molekuláris mechanizmusainak megismerésére kezdtek. Az OvCa biológiájának megértésének lassú előrehaladása és az, hogy a tudás hpv rák útja klinikai előnyökké alakult, az a klinikailag reprezentatív modellrendszerek hiánya, amelyek utánozzák az emberi betegség előrehaladását.
Számos kiváló értékelés megvitatja az OvCa biológia jelenlegi ismereteit.
A modellrendszerek jelenlegi állapotának áttekintésével a remény az, hogy ösztönözzük a megbeszéléseket arról, hogyan lehetne javítani ezeket a modelleket, valamint hogy szükséges referenciát biztosítsunk.
Az OvCa biológiája különleges kihívást jelent a modellrendszerek fejlesztésére. A "petefészekrák" néven nevezett betegség nem egyetlen entitás, hanem számos szövettani altípusból szérikus, endometrioid, tiszta sejt és nyálkahártya áll, amelyek molekuláris aberrációi.
Replikációs kompetens, legyengített herpes simplex vírus típusú HSV-1 mutánsokat fejlesztettünk ki, amelyeket HFnek és Hhnek neveztek, és amelyeket az onkolitikus aktivitásuk szempontjából kiértékeltek.
A lehetséges helyek közé tartozik a hasi hasüreg és a petefészek fimbriae, valamint a petefészek felszíni epitheliuma OSE. Az epithelialis OvCa metasztázis kezdeti korai eseménye a peritoneális üregbe történő proteináz által közvetített elterjedés. Az OvCa háromdimenziós kulturális modelljei a tumor mikrokörnyezetének feltérképezésére A petefészek tumorok nem petefészekrák xenografts egerek sejtek szilárd mátrixa, hanem epiteliális, stromális, immun- és endoteliális sejtek keveréke.
Mivel az OvCa-t gyakran széles körben terjesztik sok mikroszkópos implantátummal, amelyeket nem lehet sebészeti úton eltávolítani, ami az első 2—3 éven belül betegség megismétlődéséhez vezet, kritikus szükség van a metasztatikus implantátumok korai eseményeinek részletesebb megértésére.
Ezek a kísérleti kérdések új modellrendszereket igényelnek, amelyek célja az OvCa TME-ben előforduló események összefoglalása. Míg az OvCa biológia ismeretei nagyrészt a műanyagon két dimenzióban termelt rákos sejtekből származó kísérletekből származnak, az OvCa iniciáció, progresszió petefészekrák xenografts egerek metasztázisok vizsgálata háromdimenziós 3D rendszerben számos előnnyel jár.
A kutatásról
Ezért az extracelluláris mátrixokat ECM és a stromasejteket tartalmazó 3D modellek lehetőséget nyújtanak az OvCa és a stromasejtek petefészekrák xenografts egerek átbeszélés megértésére; a stromelemek sejt-adhézióhoz, invázióhoz és tápanyag-hozzáféréshez való hozzájárulásának részletes elemzéséhez; és értékelje a Petefészekrák xenografts egerek hatását a tumorsejtek túlélésére, proliferációjára és differenciálódására.
OvCa sejtek és 3D mátrixok A 16, 17 3D kultúrák létrehozásának kezdeti stratégiái az OvCa sejtvonalak vagy az elsődleges sejtek ECM különböző formáival való összekeverésével kezdődtek. A szubmesothelialis mátrix érintkezést követő korai eseményeket a kollagén gélek tetején lévő sejtek tenyésztésével modellezzük, lehetővé téve a metasztatikus rögzítést kísérő génexpressziós változások értékelését 1Aa — c ábra.
Rák őssejtek Absztrakt A rákos őssejtek a rákos sejtek alpopulációja, amelyet az önmegújulási képesség, a tumorigenezis és a gyógyszer-rezisztencia jellemez. Ennek a tanulmánynak a célja az volt, hogy megvizsgálja a HMGA1, a sok különböző rákban bőségesen expresszálódó kromatin-átalakító faktor szerepét a rákos őssejtek szabályozásában petefészekrákban.
Valójában a metasztatikus aggregátum sikeres növekedése egy mechanikusan korlátozott mátrix mikrokörnyezetben való proliferációt igényel, amelyet a mátrix-lebontó proteinázok, például az 1-es típusú mátrix metalloproteináz expressziója elősegít, amely elősegíti a szaporodást egy intersticiális kollagén-mileu-ban.
A A sejtkontaktus 3D-kultúrájú modelljei a szubmesothelialis kollagénnel. A rágcsáló szubmesothelialis kollagén mátrix szkennelő elektronmikroszkópos képe SEM. A fluoreszcens mikroszkópiával borított konfokális reflexiós mikroszkópia a 3D-s mátrixon belüli sejteket ábrázolja.
Az a, b ábrán bemutatott mikroszkópok jóvoltából Yueying Liu, a Notre Dame-i Egyetem jóvoltából állnak, és c dr. Az e pontban bemutatott mikroszkópos dr. Petefészekrák xenografts egerek Moss, az Északnyugati Egyetem jóvoltából.
Szabadalom és termékfejlesztés
Foszfáttal pufferolt sóoldat hozzáadása után a tenyészedénybe a nedvesség fenntartása érdekében a fedelet óvatosan megfordítjuk. Az aggregációt követően az egyes MCA-kat további vizsgálatokban szubkultúrázhatjuk.
Egy egyedi MCA-t szubkultáltunk egy I típusú kollagénnel bevont fedőlapra, és 12 óra elteltével fényképeztük.
A diszperziót DAPI festéssel és a nukleáris távolság mérésével lehet meghatározni. C A petefészekrák in vitro modelljei összefoglalják a peritoneális metasztázisokat. Az elsődleges humán omentalis fibroblasztokat ECM-be ágyazzák, és egy elsődleges humán omentalis mesothelialis sejtek rétegét helyeztük fel a tetejére.
A petefészekrák-sejteket hozzáadjuk a tenyészethez, és vizsgáljuk a rákos sejtek adhézióját, invázióját és proliferációját. Fluoreszcensen jelölt OvCa sejtek alkalmazásával a gén és a fehérje expresszió változásait egyedileg lehet értékelni a rákban és kako se lijeci papilloma vírus stromasejtekben.
D Az ip adhézió korai eseményeinek ex vivo peritoneális explantációs modellje. A középvonali bemetszésből nyert, rágcsáló egér peritoneális szövetet a mesothelialis oldalra erősítjük a szilasztikus gyantához, és foszfát-pufferolt sóoldatba PBS merítjük. A szövetek integritását 48 órán keresztül tartják fenn.
Fluoreszcensen jelölt tumorsejtek hozzáadása az explantátumhoz lehetővé teszi petefészekrák xenografts egerek sejt lizátum relatív fluoreszcenciáját, c fagyasztott szakaszok fluoreszcencia mikroszkópiáját, d konfokális mikroszkópiát vagy e pásztázó elektronmikroszkópiát. A e, kerek tumorsejtek alatt látható a macskaköves mesothelium.
Új molekuláris kezelési lehetőséget azonosított az MTA TTK kutatója a vastagbélrák kezelésére | MTA
Ne feledje, hogy a c — e képekben az OvCa sejtek az explantumhoz való hozzáadása után 2 órás időpontot mutatunk be. Teljes méretű kép Szferoidok vagy többsejtű aggregátumok Azok az ovCa szferoidok, amelyek mérete 30 és μm között van, a páciens ascites ból izolálható, vagy azáltal, hogy OvCa sejteket növesztenek nem tapadó lemezeken, 24 spinning-lombikban, 25 vagy a függő-csepp tenyésztési módszerrel 1B.
A kollagén felülethez való tapadás után a sejtek egyedi mRNS-profilokat kapnak, amelyek jobban hasonlítanak az in petefészekrák xenografts egerek tumor-gén expressziós profiljaira. Nevezetesen, ben az első 3D peritoneális tenyészetet használtuk arra, hogy megvizsgáljuk a primer humán OvCa sejtek tapadását a szarvasmarha szaruhártya endoteliális sejtjeiből származó primer humán mesothelialis sejtekhez.
Ábramelyeket mesothelialis sejtek együttesével tenyésztettünk. A 3D-s organotípusos modell tumorból származó primer humán OvCa sejteket vagy rákos sejtvonalakat használ, amelyek omentum eredetű primer humán mesothelialis sejtekkel, primer humán fibroblasztokkal és betegből származó ECM-sel vannak tenyésztve 1C.
Ez a modell összefoglalja az OvCa metasztázisának kulcsfontosságú eseményeit, beleértve az adhéziót, a proliferációt és az inváziót, ezáltal a megfelelő szövet morfológiai és funkcionális jellemzőit in vivo helyreállítva. A fluoreszcensen jelölt sejtek és a fluoreszcencia által aktivált sejtválogatás alkalmazásával a gén- vagy fehérjeszintek és a poszt-transzlációs módosítások együttesen vizsgálhatók a rákos sejtekben, a mesothel sejtekben vagy a fibroblasztokban a ko-tenyészet után.
HUA2 - Neoplazmák kezelése vírusokkal - Google Patents
A peritoneális metasztázis 3D organotípusos tenyészete különösen alkalmas predikciós preklinikai modellként történő alkalmazásra a gyógyszer teszteléséhez, mivel az ex vivo és in vivo vizsgálatokban a gyógyszer érzékenysége a 3D modellben összefoglalható. Peritoneális és szervraktánsok Az ex vivo humán vagy egér peritoneális vagy túlsúlyos explantátumokat alkalmazó 3D-s rendszereket használják az OvCa tumorsejtek interakcióinak értékelésére az intenzív peritoneális szövetekkel nem publikált MSS.
Rákmodellek Absztrakt A szkrínelési vizsgálatokban a 3, 4, 5, 4'-tetrametoxiszilbene DMU négy metabolitjának citotoxikus aktivitását vizsgáltuk A és SKOV-3 petefészekráksejtek ellen. A további vizsgálatokhoz a legaktívabb 3'-hidroxi-3, 4, 5, 4'-tetrametoxiszilbenet DMU metabolitot választottuk.
Fluoreszcensen jelölt OvCa sejtek alkalmazása lehetővé teszi az adherens sejtek optikai megfigyelését, valamint a konfokális mikroszkóppal történő megjelenítést. A szkenner elektronmikroszkópos módszer a korai heterogén sejt-sejt-adhéziós kölcsönhatások morfológiájának megjelenítésére is használható.
Továbbá, a explantumok szövettanilag szétválaszthatók és felhasználhatók a tumorsejtek behatolásának mélységének számszerűsítésére különböző körülmények között. Ez a modell lehetővé teszi az adhézió mértékének és kinetikájának figyelemmel kísérését, a peritoneális horgonyzás korai eseményeinek megfigyelését és a potenciális ragasztóellenes gyógyszerek tesztelését.
Hasonlóképpen, a szöveti explantátumok felhasználhatók a petefészek és a petefészek potenciális progenitorjának preneoplasztikus változásainak értékelésére is. Például 3D-alginát-állványokat alkalmaztunk a petefészek felszíni sejtjeinek, a normál egér ovidukciók és a pávián fimbria ex vivo növekedésének támogatására.
Mindazonáltal a fejlett 3D és ex vivo OvCa modellek kifejlesztése és alkalmazása áthidalhatja az in vitro vizsgálatok, az OvCa egérmodellek és az in vivo humán betegségek közötti szakadékot.
Egy adott kísérlethez egy modellrendszer kiválasztása tükrözi a kezelendő kísérleti kérdést és a vizsgált OvCa metasztázis stádiumát.
